Научно-практический журнал
[О компании] Издательство 'Цитокины и воспаление' - Журнал 'Цитокины и Воспаление'

197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д. 12,
Институт экспериментальной медицины РАМН
Тел.: (812) 543 52 14, +7 921 984 11 30, +7 921 909 55 49
Факс: (812) 543 52 14
E-mail:
Web: www.cytokines.ru


  


2018 год
1-4 номера

О Журнале

Текущий год
Архив

Рубрики
Подписка

NEW Книжная полка
NEW Стол заказов

Карта сайта
Правила для авторов

Поиск

Контакты
Наши партнеры:

Русский языкEnglish language
Карта сайта Написать письмо, наши координаты

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Журнал 'Цитокины и воспаление', 2007, № 3

Подписаться на 2019 год

Заказать этот номер

Заказать эту статью в PDF

Оригинальные статьи

Номер 3'2007

МОДУЛЯЦИЯ ВЫРАБОТКИ ЦИТОКИНОВ АДРЕНОМИМЕТИКАМИ НА ФОНЕ СТРЕССА И АНТИГЕННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ

Е.Ю. Шерстобоев, А.П. Бабенко

Изучали влияние альфа- и бета-адреномиметиков на продукцию цитокинов спленоцитами стрессированных мышей (CBAxC57Bl/6) F1 на фоне развития гуморального иммунного ответа. TNFα, IL-1β и IL-6 определяли в супернатантах спленоцитов, стимулированных ЛПС, а IFNγ, IL-2, IL-4 и IL-10 - в культурах спленоцитов, стимулированных Кон А. Введение альфа-адреномиметика мезатона на фоне стресса и последующей иммунизации приводило к кратковременному повышению продукции IL-6 и IFNγ. Однако при этом подавлялась выработка цитокинов как Th1- (IL-2), так и Th2-типа (IL-10). Применение бета-адреномиметика изопротеренола у стрессированных и иммунизированных мышей в большей степени стимулировало выработку цитокинов Th1-типа - IFNγ и IL-2. При этом также повышалась продукция IL-4, а на отдельных сроках - TNFα и IL-1β; выработка IL-10, напротив, снижалась. (Цитокины и воспаление. 2007. Т. 6, № 3. С. 40-43.)

Ключевые слова: цитокины, иммобилизационный стресс, гуморальный иммунный ответ, альфа- и бета-адреномиметики.

Различные стрессовые воздействия приводят к значительному повышению уровня глюкокортикоидов и катехоламинов в плазме крови [13]. При этом происходит подавление функциональной активности Th1 лимфоцитов и продукции ими провоспалительных цитокинов, таких как IL-12, TNFα и IFNγ. В целом, супрессируя выработку цитокинов Th1, глюкокортикоиды и катехоламины способствуют повышению активности Th2 и продукции ими IL-4, IL-10 и трансформирующего фактора роста (TGFβ) [8]. Однако длительный стресс может угнетать развитие специфического гуморального ответа и снижать фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов [2]. При сочетании стресса и антигенного воздействия локальные эффекты катехоламинов в условиях специфического окружения могут быть различными. В связи с этим целью работы явилось изучение модулирующего влияния альфа- и бета-адреномиметиков на продукцию цитокинов спленоцитами стрессированных мышей на фоне развития гуморального иммунного ответа.

Материалы и методы

Исследования проведены на 160 мышах-самках (CBAxC57Bl/6) F1 в возрасте 2-2,5 месяцев, массой 18-20 г, полученных из лаборатории экспериментального биомоделирования НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН. Мышей иммунизировали тимусзависимым антигеном - эритроцитами барана (ЭБ), полученными из ФГУП НПО "Микроген" (г. Томск). ЭБ трижды отмывали стерильным физиологическим раствором (ФР) и вводили однократно внутрибрюшинно по 0,2 мл 15%-ной взвеси. Для изучения влияния стресса на функциональную активность лимфоидных клеток мышей перед иммунизацией подвергали иммобилизации в полых замкнутых цилиндрах в течение 24 ч. Одной группе животных (n = 40) за 3-5 мин до иммобилизации и через 6 часов после начала воздействия вводили подкожно альфа-адреномиметик мезатон (Опытный завод ГНЦЛС, г. Харьков, Украина) в дозе 5 мг/кг, другой (n = 40) - бета-адреномиметик изопротеренол ("Sigma", USA) в дозе 2 мг/кг. Непосредственно перед введением препараты растворяли в стерильном ФР. В качестве контроля использовали животных (n = 40), подвергнутых иммобилизации и последующей иммунизации, которым в аналогичных условиях эксперимента вводили эквивалентный объем ФР. Мыши (n = 40), которых только иммунизировали и не подвергали иммобилизации, выступали в качестве группы сравнения. Животных умерщвляли методом декапитации под эфирным наркозом. Забор материала для исследований осуществляли на 1-е, 4-е, 7-е и 10-е сутки после иммунизации ЭБ.

Уровни цитокинов TNFα, IL-1β, IFNγ, IL-2, IL-4, IL-6 и IL-10 определяли в супернатантах спленоцитов экспериментальных животных. Для получения спленоцитов селезенки измельчали стеклянным гомогенизатором в среде 199 (ГНЦ ВБ "Вектор", Новосибирск), с 40 мкг/мл гентамицина ("Дальхимфарм", Хабаровск) и 5%-ной эмбриональной телячьей сывороткой (ЭТС) ("BioClot", Germany) [1]. Клетки фильтровали через капроновую сеточку, центрифугировали и дважды отмывали средой 199 с 5 % ЭТС. Осадок ресуспендировали в полной культуральной среде (ПКС) следующего состава: 90 % среды RPMI 1640 (ГНЦ ВБ "Вектор", г. Новосибирск), 10 % ЭТС, предварительно инактивированной теплом (56 °С, 30 мин), 2 мМ L-глютамина ("Sigma", USA), 10 мМ HEPES ("Flow", Great Britain), 40 мг/л гентамицина, 25 мкМ 2-меркаптоэтанола ("Sigma", USA), после чего подсчитывали число жизнеспособных клеток с трипановым синим в камере Горяева. Количество жизнеспособных спленоцитов доводили до концентрации 2x106 клеток/мл и инкубировали в ПКС в течение 20 ч при 37 °С, 5 % СО2 и влажности воздуха 100 %, при добавлении к части спленоцитов конканавалина А (Кон А) ("ICN", USA), 5 мкг/мл, а к части - липополисахарида (ЛПС) Escherichia coli, Serotype 055: B5 ("Sigma", USA), 10 мкг/мл. По окончании инкубации собирали супернатанты и хранили не более месяца при -50 °С.

TNFα, IL-1β и IL-6 определяли в супернатантах культур спленоцитов, стимулированных ЛПС, а IFNγ, IL-2, IL-4 и IL-10 - в супернатантах культур спленоцитов, стимулированных Кон А, иммуноферментным методом с использованием наборов фирмы "Amersham Pharmacia Biotech" (Great Britain) и анализатора иммуноферментных реакций "Униплан" АИФР-01 (ЗАО "Пикон", Москва).

Статистическую обработку результатов осуществляли статистическими программами Statistica 5.0 с предварительной оценкой нормальности распределения и использованием t-критерия Стьюдента.

Читайте статью целиком
в печатной версии журнала
!

Содержание | Следующая статья | Предыдущая статья

Подпишитесь на журнал "Цитокины и Воспаление" он-лайн!


Начата подписка на 2019 год!

Обновление на книжной полке: компакт-диск Цитокины и воспаление, 2008 год.

© 2002-2019 Цитокины и Воспаление